脂肪測定儀---糧油檢驗 植物油脂中縮水甘油脂肪酸酯的測定2

　3.2.2 樣品測定

　　液相色譜條件

　　色譜柱：反相色譜柱（4.6 mm×150 mm，5μm）或相當型號色譜柱。柱溫：40oC。進樣量：20μL。流動相：A為甲醇/水（92:8，v/v），B為異丙醇。流動相洗脫程序：0-18.0 min，0%B（流速為1mL/min）；18.1-32.0min，100%B（流速為0.5mL/min）；32.1-42.0min，0%B（流速為1mL/min）。

　　質(zhì)譜條件

　　離子源：APCI源。噴霧器溫度：500oC。干燥氣溫度：350oC。鞘氣壓力：50arb。輔助氣壓力：2rb。電暈電流：8μA。選擇性離子監(jiān)測（SIM）：C16:0-GE為m/z 313.3，C18:0-GE為m/z 341.2，C18:1-GE為m/z 339.4，C18:2-GE為m/z 337.3，C18:3-GE為m/z 335.3。

　　根據(jù)縮水甘油脂肪酸酯工作溶液的濃度及其峰面積，繪制標準曲線。

　　3.2.3 方法學驗證

　　3.2.3.1 標準曲線及相關(guān)系數(shù)

　　以標準工作液濃度（c）為橫坐標，峰面積（A）為縱坐標做標準曲線并計算相關(guān)系數(shù)，結(jié)果如表1所示。

　　表1 縮水甘油脂肪酸酯的標準曲線方程及相關(guān)系數(shù)

　　3.2.3.2 方法回收率及精密度實驗

　　取GE含量都低于低檢出限的樣品作為基質(zhì)，稱取1.00g，加入100μL C16:0-GE、C18:0-GE、C18:3-GE濃度為100ng/mL同時C18:1-GE、C18:2-GE濃度為200ng/mL的標準混合溶液，按照前述方法處理和分析樣品，計算回收率（如表2所示），平均加標回收率為96.25%~106.18%，RSD為2.87%~5.32%，回收率和精密度都能滿足分析要求。

　　表2 加標回收率和精密度試驗結(jié)果（n=3）

　　在AOCS標準方法的比對驗證實驗中，共有25家實驗室參加、且均提交兩組平行實驗結(jié)果，取平均值后與我們提交的結(jié)果對比見表3。結(jié)果顯示，本實驗室的檢驗結(jié)果與比對檢測結(jié)果平均值非常接近。

　　表3檢測結(jié)果對比